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  • 2020

    6-15

    標準菌株是屬于種屬鑒定的規(guī)范參照菌,而質(zhì)控菌株,往往是從功能或用途上講的,通常是以標準菌株用來做質(zhì)控的。標準菌株使用注意事項:1、選擇合適的培養(yǎng)基:勿使用選擇性培養(yǎng)基。一般使用非選擇性的增菌培養(yǎng)基,因為微生物在選擇性培養(yǎng)基中生長某些生物特性可能丟失,保藏的菌種的生物特性可能與標準菌株特性不同。2、菌液的濃度:菌液的濃度一般越大,菌種保存時間越長。保藏時細菌常使用菌液,霉菌常用無菌水或生理鹽水制備成的孢子懸液。3、甘油濃度:甘油終濃度一般為10%~20%。由于甘油原液太粘稠,需...

  • 2020

    6-15

    菌種是從事微生物學及生命科學研究的基本材料,在醫(yī)學領域中,診斷制品的制備,菌苗的生產(chǎn)、微生物致病性研究。1、梭氏法將容有1滴細胞懸液的小管﹐置于盛有氫氧化鉀或五氧化二磷吸水劑的大試管中﹐用真空泵抽至1、3帕時﹐將大試管密封保存。這是為減少細胞死亡率而采取的一種不經(jīng)凍結(jié)﹑緩慢脫水的干燥保藏法﹐適用于多種細菌﹑真菌。2、冷凍真空干燥法將細胞懸液每0、1~0、2毫升注入一無菌安瓿瓶﹐于-40℃預凍1小時﹐再于-20~30℃﹑真空度為13、3帕的條件下脫水。在脫水過程后期﹐安瓿瓶外溫...

  • 2020

    4-20

    所有體外培養(yǎng)細胞,包括初代培養(yǎng)及各種細胞系,當生長達到一定密度后,都需做傳代處理。傳代的頻率或間隔與培養(yǎng)液的性質(zhì)、接種細胞數(shù)量和細胞增殖速度等有關。接種細胞數(shù)量大、細胞基數(shù)大、相同增殖速度條件下,細胞數(shù)量增加與飽和速度相對要快(實際上細胞接種數(shù)量大時細胞增殖速度比稀少時要快)。連續(xù)細胞系和腫瘤細胞系比初代培養(yǎng)細胞增殖快,培養(yǎng)液中血清含量多時細胞增殖比少時快。以上情況都會縮短傳代時間。所謂細胞“一代”一詞,系僅指從細胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間,這已成為培養(yǎng)工作中的一種習慣說...

  • 2020

    4-11

    細胞株和細胞系的區(qū)別,列表說明我來答這么龍厄爾尼諾LV.12019-02-24聊聊細胞株和細胞系的區(qū)別:一、概念不同1、細胞株:細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株(CellStrain)。2、細胞系:細胞系(cellline)指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。二、形成方法不同1、細胞株:通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物成為細胞株。...

  • 2020

    4-7

    細胞在體外進行培養(yǎng)時影響生長的幾點因素細胞在體外進行培養(yǎng),失去了機體的調(diào)節(jié)和控制,因此,除滿足營養(yǎng)的要求外,還必須使細胞生存環(huán)境晝接近活體的環(huán)境.外環(huán)境的培養(yǎng)條件如溫度、滲透壓、酸堿度等均能影響細胞的生長.一、溫度:一般哺乳類及禽類細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃.溫度過高或過低都會影響到細胞的生長.細胞耐受低溫的能力比抗熱的能力強,在低溫下,細胞的代謝活力及核分裂降低.溫度低于0℃時,雖影響細胞代謝,但并無傷害作用.把細胞置于23~25℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減...

  • 2020

    3-19

    什么時候需要穩(wěn)定細胞株?以下實驗,構(gòu)建穩(wěn)定細胞株而不是瞬時轉(zhuǎn)染更能滿足實驗要求:1)外源片段在分裂細胞中長期(2周)穩(wěn)定表達。雖然普通轉(zhuǎn)染實驗一般只能保證2-4天的轉(zhuǎn)染和表達效率,但腺病毒載體在多數(shù)分裂細胞中可以維持2-4周內(nèi)的高轉(zhuǎn)染效率和表達周期。而非分裂細胞,可以使用腺相關病毒載體轉(zhuǎn)導外源基因,因為腺相關病毒載體在許多非分裂細胞中可以保持長達1年的高效表達。2)需要構(gòu)建使用誘導表達系統(tǒng),這主要是由于:a)過表達基因或者干擾目的基因引起細胞毒性或者抑制細胞生長等不利因素;b...

  • 2020

    3-18

    細胞培養(yǎng)注意事項(入門級)總的原則:無菌操作、保證細胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性按時間順序整理1、細胞房和生物安全柜(或超凈工作臺)先開紫外照射30min。作用:對環(huán)境滅菌(空氣)。(備注:如果著急,至少也要開15分鐘)在做實驗之前考慮好需要哪些物品。開始照射之前,將所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超凈工作臺)里面。常用移液槍或電動移液器等,需要在工作臺上放置一套設備。細胞培養(yǎng)箱一般都已經(jīng)調(diào)整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時更換。2、顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭。注意:顯微...

  • 2020

    3-9

    細胞養(yǎng)不好?那可能是這些沒注意到位1、購買的細胞死亡或存活率不佳可能原因?細胞冷凍管解凍后,為何會有細胞數(shù)目太少的情形?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸浮細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于–80℃太久。研究人員在冷凍細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻...

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